胎牛血清的這些指標你都知道嗎？

牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基，含有豐富的細胞生長必須的營養成份，常用于動物細胞的體外培養，具有極為重要的功能。
1.提供對維持細胞指數生長的激素，基礎培養基中沒有或量很少的營養物，以及主要的低分子營養物。
2. 提供結合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結合或調變它們所結合的物質活力。
3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合，起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害。

胎牛血清都有哪些重要的指標

一、內毒素
內毒素是革蘭氏陰性菌的細胞壁外壁層上的*成分。當細菌死亡自溶或粘附在其它細胞時，才表現其毒性。內毒素直接參與細胞凋亡，血清中內毒素含量越低，對細胞毒性越小，越利于細胞的生長和傳代；內毒素含量過高，會直接導致細胞提前老化。國際上規定，胎牛血清的級別，應以內毒素水平的高低來確定，其中，特級胎牛血清的內毒素應<10EU/ml

二、血紅蛋白含量
胎牛血清的顏色會根據血紅蛋白含量的不同表現出黃色、淡黃色、橘紅色、微紅色等。細胞培養用血清的標準是血紅蛋白含量不高于20mg/dl，顏色越紅，數值越高；反之，數值越低。實際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響。這個指標的意義在于能體現出采血過程的嚴謹規范程度，良好的操作能降低血清的溶血。

三、總蛋白含量
胎牛血清的總蛋白含量一般范圍是30-40mg/ml，數值偏高，說明采血的牛齡偏大，不是胎牛；數值偏低，表明血清可能摻水了。

四、pH值
根據藥典，胎牛血清的pH值在7.0-8.0之間，并沒有什么具體依據把進口血清和國產血清用7.5這個分界線界定。

五、滲透壓
胎牛血清滲透壓的檢測一般采用冰點法，滲透壓摩爾濃度（mOsmol/kg）：280-360之間

六、微生物
包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體等。隨著各個品牌血清生產條件的改善提高，細菌、霉菌等“大型"微生物幾乎能100%控制。支原體通過0.1um3次無菌過濾去除。如CellMax胎牛血清，3次0.1um無菌過濾以后，又通過培養法和DNA染色法進行支原體檢測，結果均呈現陰性才會放行銷售。關于噬菌體主要是生產環境過程中帶入，又無法過濾，很難*清除，但對血清質量影響不大，不過對于工業生產的客戶來說，往往會采用γ照射的胎牛血清來避免噬菌體。

七、免疫球蛋白
免疫球蛋白的數值能*體現出采血時的牛齡情況，新生牛血清容易產生IgM，IgG的含量也偏高；胎牛血清不含IgM，IgG的含量也較低。可以通過血清蛋白電泳SDS檢測。
低IgG的胎牛血清推薦適用于抗體生產及相關領域。

有下列情況者，對血清內毒素應格外留意篩選：
1.養干細胞時，干細胞對內毒素非常敏感，如果血清中內毒素≥3EU/ml時，干細胞很容易死亡。很多使用者，在血清在試用前，就通過提早審核該批次《檢測報告》，以決定是否入圍進行試用。
2.養免疫細胞時，過高的內毒素可誘導免疫細胞釋放炎癥因子，抑制小鼠紅細胞集落的形成等。
3.基因敲除相關的細胞實驗，培養的細胞要盡可能保持其原始狀態，任何引導細胞衰老或凋亡的試劑，都會讓后續的實驗結果“失之毫厘，謬以千里"。在準備血清和其他試劑時，選擇極低的內毒素（最好≤1EU/ml），對實驗至關重要；
4.原代培養、雜交瘤融合、細胞轉染，或者肝細胞、神經細胞、內皮等難養細胞的擴增，這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此，挑選更低的內毒素，是保證實驗順利的第一步。
5.實驗室有些細胞，需要長期培養、長期凍存，或者經常復蘇、經常培養的，血清會經常或長時間作用于細胞。為保證細胞的健康，都應該選用更低內毒素的血清，以避免內毒素長久對細胞的毒性影響。
總之，血清中內毒素含量過高，更容易導致細胞“亞健康"，造成數據不準，或細胞狀態不良、老化、甚至死亡，導致試驗中斷失敗。血清中的內毒素越低越好。
全球細胞培養學會均依據內毒素對血清的品質進行分級和命名。
內毒素含量越低的血清，級別就越高，以胎牛血清為例：
當血清中內毒素含量≤10EU/ml時，此血清為特級胎牛血清；
當血清中內毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml時，此血清為優級胎牛血清；
當血清中內毒素含量≥ 25EU/ml時，此血清為標準級胎牛血清；