產(chǎn)品搜索

產(chǎn)品分類

聯(lián)系我們

聯(lián)系人：陳經(jīng)理
電話：021-56980380
傳真：
手機：17321440983
地址：上海市嘉定區(qū)翔江公路518弄D座2樓

技術(shù)文章 / article
當(dāng)前位置：首頁 > 技術(shù)文章 > 細(xì)胞培養(yǎng)中培養(yǎng)基的作用

細(xì)胞培養(yǎng)中培養(yǎng)基的作用

2022-01-13 瀏覽次數(shù)：1767

1.液體培養(yǎng)基貯存于4℃ 冰箱，避免光照，實驗進行前放在37℃ 水槽中溫?zé)帷?S'、

2.液體培養(yǎng)基(加血清)存放期為六個月，期間glutamine可能會分解，若細(xì)胞生長不佳

可以再添加適量glutamine。

3.粉末培養(yǎng)基配制(以1升為例)：

3.1.細(xì)胞培養(yǎng)基通常須添加10%血清，因此粉末培養(yǎng)基之配制體積為900ml，pH為7.2-7.4。NaHCO3為另外添加，若將NaHCO3粉末直接加入液體培養(yǎng)基中會造成pH之誤差，或局部過堿。因此粉末培養(yǎng)基及NaHCO3粉末應(yīng)分別溶解后才混合，然后用CO2氣體調(diào)整pH，而非用強酸(HCl)或強堿(NaOH)，因為氯離子對細(xì)胞生長可能有影響，且貯存時培養(yǎng)基的pH易發(fā)生改變。生物3.2.材料：純水(milli-Q水或二次至三次蒸餾水，水品質(zhì)非常重要)，粉末培養(yǎng)基，NaHCO3

電磁攪拌器,無菌血清瓶,0.1或0.2mm無菌過濾膜,pH計，真空泵，CO2氣體。

3.3.步驟：

3.3.1.取粉末培養(yǎng)基溶于700mlmilli-Q水中，攪拌使其溶解。

3.3.2.稱取適量之NaHCO3粉末溶于200mlmilli-Q水中，攪拌使其溶解，然后通入CO2氣體至飽和，約3-5分鐘。

3.3.3.將溶解且含飽和CO2之NaHCO3溶液加入溶解之液體培養(yǎng)基中混合。混后溶液之pH應(yīng)為7.2-7.4，除非pH值偏差太大，否則不需用酸堿再調(diào)整之。若為太堿，可再通入CO2氣體調(diào)整pH。培養(yǎng)基以真空幫浦通過過濾膜時，pH會升高0.1-0.2。

3.3.4.以0.1或0.2mm無菌過濾膜過濾滅菌，同時分裝至無菌容器中，標(biāo)示培養(yǎng)基種類、日期、瓶號等，貯存于4℃。(血清亦可加入培養(yǎng)基中一起過濾)

3.3.5.配制之培養(yǎng)基配制須作生長試驗與污染測試。

上一篇：使用血清的小技巧

下一篇：科研實驗用品的種類和作用

返回列表>>