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凍存細(xì)胞時(shí)，有必要緩凍嗎？

2022-03-11 瀏覽次數(shù)：1744

一、我們先來說說何為緩凍：

緩凍即為凍存細(xì)胞時(shí)，要程序降溫——4℃ 30min，-20℃ 1h ，-80℃ 過夜，次日投入液氮內(nèi)。

二、那為什么要進(jìn)行緩凍呢？

其實(shí)所謂的緩凍是一般使用傳統(tǒng)凍存液凍存過程中需要程序降溫。

傳統(tǒng)的凍存液，一般由胎牛血清、DMSO及基礎(chǔ)培養(yǎng)基等組分組成。凍存保護(hù)的DMSO組分，在進(jìn)入細(xì)胞后結(jié)合細(xì)胞內(nèi)部的水份，降低冰點(diǎn)，防止細(xì)胞在冷凍過程中形成冰晶對細(xì)胞造成損害。

但是DMSO只能在細(xì)胞內(nèi)部保護(hù)細(xì)胞，細(xì)胞外部沒有保護(hù)，水結(jié)冰晶會(huì)在細(xì)胞膜外部受到損傷，為了防止冰晶過大，使用時(shí)必須采用程序降溫的方式，才可保證細(xì)胞復(fù)蘇的成功率（80%以上）。

若不采用程序降溫的形式，有些凍存的細(xì)胞，甚至復(fù)蘇成功率為0。

三、無血清細(xì)胞凍存液幫您輕松凍細(xì)胞！

無血清細(xì)胞凍存液，為多種保護(hù)劑組合，在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù)，大大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。無血清細(xì)胞凍存液，含多種保護(hù)劑成分。

一些保護(hù)劑，易于穿透細(xì)胞，避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞，同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞，但可以在冰晶形成之前，優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子，降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量，HAKATA無血清細(xì)胞凍存液，為多種保護(hù)劑組合，在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù)，大大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。