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技術(shù)文章 / article
細胞培養(yǎng)為什么要先裂解紅細胞？
2022-12-13 瀏覽次數(shù)：875
紅細胞裂解液
一、基本介紹
紅細胞裂解液是一種去除紅細胞簡便易行的方法，即用裂解液裂解紅細胞，它 既不損傷有核細胞又能充分的去除紅細胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細胞去除 方法,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細胞的分離純化，淋巴細胞的分離純化以及組織細 胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。經(jīng)紅細胞裂解液裂解得到的組織細胞中不 含紅細胞，可進一步用于原代培養(yǎng)、細胞融合、流式細胞分析、核酸與蛋白的分離和 提取等。
二、使用說明
①組織細胞樣品
1、新鮮組織經(jīng)胰酶或膠原酶等消化分散成單個細胞懸液，離心棄去上清液。
2、從4℃冰箱中取出 ELS裂解液，按 1:3-5 的比例向細胞沉淀中加入ELS裂解液（1ml 細胞壓積加入 3-5ml裂解液），輕輕吹打混勻。
3、 800-1000rpm離心 5-8 分鐘，離心棄去上層紅色清液。
4、收集沉淀部分，加入Hank’s液或無血清培養(yǎng)液離心洗 2-3 次。
5、如裂解不可重復步驟2和3。
6、重懸細胞，用于后續(xù)實驗；如提取RNA，最好是于步驟4開始使用DEPC水配制 的溶液中進行
紅細胞的生命周期非常短，一般只有120天，但是他繁殖的血特別快，用他的話就會特別的能體現(xiàn)細胞的分裂，然后他是所有細胞中分裂最快的所以這個細胞他是非常的有有價值的，所以對于細胞培養(yǎng)他非常的有用。就是它的構(gòu)造非常簡單，里面沒有任何的細胞器，只有細胞膜跟蛋白質(zhì)。
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