使用Ham's F-12K培養(yǎng)基（推薦HAKATA貨號A20011）；10%胎牛血清(推薦HAKATA貨號：HN-FBS-500)；1%雙抗（推薦HAKATA貨號：H8611）

AOLEWIS 

專注于細胞及系列產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和服務，并提供專業(yè)細胞技術服務外包的技術企業(yè)。公司主要研發(fā)生產(chǎn)細胞系、原代細胞、胎牛血清、基礎培養(yǎng)基、完培、輔助試劑等系列產(chǎn)品，提供細胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購服務；細胞庫儲存細胞系1309余種，同時通過不間斷引種細胞擴大豐富細胞種類；公司還提供人源、小鼠源細胞系的近期STR鑒定，其他種屬細胞的種屬鑒定服務，細胞標志物檢測，污染檢測等細胞相關實驗服務。公司細胞業(yè)務覆蓋國內(nèi)各大高校生物實驗室、生物研究機構及一些生物科研、診斷、制藥公司，不斷為廣大科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務！

注意事項↓

懸浮細胞漂浮的處理方法

注意:瓶中運輸培養(yǎng)基不能繼續(xù)使用，請換用按照說明書培養(yǎng)條件新配制的完培來培養(yǎng)細胞。培養(yǎng)懸浮細胞建議用未經(jīng)TC處理的培養(yǎng)瓶。

1.收到貨發(fā)現(xiàn)有任何異常現(xiàn)象、污染、漏液、細胞漂浮等，請拍照記錄，并及時聯(lián)系我們銷售人員或技術支持;

2.用 75% 酒精擦拭瓶身，封口膜可以不用撕去，將 T25 瓶置于培養(yǎng)箱中靜置 2~4h 后進行操作;懸浮細胞請將培養(yǎng)瓶豎立在培養(yǎng)箱中靜置。在此期間，請查看說明書以確定細胞屬性;

3. 靜置4h后，請將瓶內(nèi)所有細胞收集至6個15ml的離心管110g(1000rpm)離心3min,將所有離心后的細胞沉淀收集到一個T25培養(yǎng)瓶內(nèi)，平放10分鐘，鏡下觀察細胞密度，拍照記錄后放入培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)，第二天密度達到80%即可傳代;

4.懸浮細胞傳代方法:觀察細胞無碎片無死細胞的情況下，建議直接加入新鮮完培直接分瓶即可。

貼壁細胞漂浮的處理方法

注意：部分細胞由于貼壁松散，會出現(xiàn)運輸后漂浮，冬天氣溫低時也會出現(xiàn)細胞收縮漂浮，屬于不可避免

因素，正確處理后均可以正常生長。

1 .將培養(yǎng)瓶內(nèi)所有培養(yǎng)基轉入無菌離心管，離心收集細胞(1200rpm約250g-300g離心力，離心

3-5min)去除舊培養(yǎng)基;

2. 用PBS重懸細胞，將所有細胞收集到一個離心管中，再次離心(1200rpm約250g-300g離心

力，離心3-5min)去除PBS;

3 .加入1ml左右胰酶EDTA溶液，0.25%重懸細胞，混勻即可，建議震動離心管混勻，避免吹打細

胞，放入培養(yǎng)箱消化細胞，根據(jù)細胞特性決定消化時間(TM3、TM4、293 系列約1~2分鐘);

注意：部分細胞不能使用胰酶消化，請注意查看細胞說明書;單顆漂浮的細胞不需要胰酶處理。

4. 消化好后，用移液槍輕輕吹打細胞懸液，使細胞團分散，迅速加入3-5ml含10%以上血清的培

養(yǎng)基混勻終止消化，離心(1200rpm 3min)去除胰酶;

5.加入5ml左右的細胞完培混勻，按比例接入無菌培養(yǎng)瓶中;

6. 顯微鏡下觀察細胞是否成均勻分散的單顆細胞，若有3-5個成團的小細胞團可不用重新消化，使

之貼壁后待細胞生長穩(wěn)定后再次傳代消散細胞。

產(chǎn)品使用 僅限于科學研究，不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。